Перечень доступных методик диагностики в последние десятилетия быстро расширяется, диагносты пытаются в новых методах объединить преимущества всех прежних анализов, избавившись от всех их прежних недостатков.
В последнее время все чаще в перечне диагностических процедур фигурирует иммуноферментный анализ — современный и достаточно новый тест, о котором мало известно обычному человеку, не связанному с медициной. Тем не менее эта методика стремительно пополняет ряды своих приверженцев среди квалифицированного медперсонала. Что она представляет собой и в каких случаях ее следует использовать, можно попытаться разобраться, ознакомившись с ее особенностями и главными характеристиками.
Суть метода
Иммуноферментное исследование — инструментально-лабораторная методика, построенная на молекулярной реакции «антиген-антитело», позволяющая обнаруживать специфичные белки в биологических материалах (образцах для исследования). Такими белками могут быть энзимы, разнообразные микроорганизмы (вирусы, бактерии, грибки), простейшие и т. д.
После открытия метода ему было дано название ELISA-тест, что не имеет отношения к имени первооткрывателей, а является аббревиатурой полного названия в английском варианте — enzyme-linked immunosorbent assay. Медики всего мира используют это название, некоторые врачи в русскоязычных странах тоже так называют этот тип исследования.
Основной принцип метода заключается в молекулярной реакции «антиген-антитело».
Антигеном является любая чужая молекула, попавшая в человеческий организм в составе микроба-возбудителя болезни. Антигены представляют собой, как правило, белковые молекулы. Кроме микроорганизмов таким «чужаком» могут быть клетки чужой крови, не совпадающие по группе или резус-фактору.
В ответ на попадание такого антигена в организме запускается иммунная реакция, которая направлена на защиту от любых чужих молекул. Это происходит за счет синтеза специальных агентов иммунной системы — антител (иммуноглобулинов). Каждое антитело подходит только к определенному антигену, и нейтрализует патогенного «чужака», связываясь с ним в единый комплекс. Именно процесс такого связывания и называют реакцией «антиген-антитело».
Виды антител
Все антитела (иммуноглобулины) делятся на 5 видов в зависимости от того, на каком этапе иммунного ответа они появляются:
- Класс М (IgM). Всплеск таких иммуноглобулинов наблюдается в течение нескольких первых суток после внедрения инфекции или другого патогенного агента. Приблизительно через 6 недель они начинают растворяться и исчезать.
- Класс G (IgG). Синтезируются на втором этапе, чтобы побороть болезнь. После полной ликвидации чужих молекул они продолжают присутствовать в крови в небольшом количестве для обеспечения иммунитета на случай повторного заражения.
- Класс А (IgА). Такие иммуноглобулины отвечают за защитные функции слизистых оболочек организма, через которые патогенным элементам проникнуть легче всего, так как слизистый эпителий гораздо тоньше и нежнее обычных кожных покровов.
- Класс Е (IgЕ). Эти специфические глобулины направляют свое действие против паразитарных инфекций, поражающих организм человека. Они появляются вне зависимости от того, какая система органов поражена паразитами.
- Класс D (IgD). Этот класс всегда обнаруживается даже у здоровых людей. У детей до 10 лет он постепенно нарастает, после чего его количество при условии абсолютного здоровья не изменяется. Если же показатель увеличивается выше нормы, то это может свидетельствовать о наступившей беременности, астмы, иммунодефицита и пр.
Для ИФА-диагностики чаще всего важны уровни иммуноглобулинов IgG, IgM и IgA. По их титрам можно узнать, переболел ли человек болезнью раньше или заразился в недавнем времени, выработался ли у него иммунитет или его организм беззащитен перед патологией.
Достоинства и недостатки иммуноферментного анализа
На данный момент ИФА — один из самых точных и чувствительных методов. Он взят на вооружение специалистами в разных областях медицины и продолжает расширять сферы применения.
Преимущества метода
- Высокая точность полученных данных.
- Чувствительность (позволяет обнаружить необходимое вещество даже при минимальном присутствии возбудителя в образце).
- Возможность диагностики в первые дни болезни или в инкубационном периоде.
- Скорость получения данных в сравнении с другими методиками подобной точности.
- Высокая автоматизация процесса и минимальное участие человека, что снижает погрешность исполнителя.
- Получение данных о стадии патологического процесса и эффективности выбранной терапии.
- Безболезненность и малая инвазивность при отборе материала.
Недостатки метода
- В большинстве случаев позволяет определять ответ организма на патогенный агент, а не самого возбудителя.
- Перед исследованием должно быть точно известно предполагаемое заболевание, так как тест высокоспецифичен.
- Вероятность ложных показателей, вызванных техническими моментами, приемом лекарственных средств, одновременным присутствием нескольких хронических заболеваний или нарушениями обменных процессов в организме больного.
- Интерпретацию результатов должен делать только высококвалифицированный специалист, так как для трактовки полученных данных необходимо владеть специальной подготовкой и большим запасом медицинских знаний в определенной области.
- ИФА — достаточно редкий анализ, поэтому выполняют его далеко не во всех диагностических лабораториях.
- Метод довольно дорогой, так как помимо реактивов в лаборатории должно быть дорогостоящее многочисленное оборудование и образцы антигенов, изготавливаемых в специальных институтах.
В каких случаях используют иммуноферментный анализ
Полный перечень показаний к назначению иммуноферментного исследования очень широк, он включает в себя практически все отрасли медицины.
Чаще всего ИФА применяют для таких целей:
- выявление инфекционных заболеваний;
- диагностика венерических болезней;
- определение иммунного статуса или отдельных аутоиммунных заболеваний;
- идентификация онкомаркеров;
- определение гормонов.
В случае инфекционных и вирусных заболеваний методика позволяет выявить следующие патологии:
- все типы вирусных гепатитов;
- вирус Эпштейна-Барра;
- все TORCH-инфекции;
- все типы кишечных инфекций;
- большинство паразитарных инфекций;
- хеликобактериоз и пр.
Кроме того, ИФА позволяет быстро и эффективно определить инфарктное состояние, оценить репродуктивный потенциал организма, выявить аллергию, ее источник и пр.
Иммуноферментная методика используется для проведения клинических исследований в ходе разработки новых лекарственных препаратов и в оценке их влияния на организм человека.
Типы образцов и методы их отбора для исследования
Чаще всего исследуемым материалом для иммуноферментного анализа служит кровь, которую берут из локтевой вены пациента. Отбор пробы проводится натощак, преимущественно в утреннее время. После отбора из крови отделяют и убирают те форменные клетки, которые мешают проведению исследования, оставляя только сыворотку.
При диагностировании мочеполовых инфекций часто материалом становятся мазки из слизистых тканей половых органов, слизь из уретры или шейки матки, образцы из прямой кишки, соскобы с эрозий или язв в области паха и с других участков тела. Мазки могут брать и с ротовой полости, а также с носоглотки.
Иногда иммуноферментное обследование используется в акушерской и гинекологической практике во время беременности для определения состояния околоплодных вод. В таком случае образцом становится амниотическая жидкость. Для этого отбирают небольшое количество жидкости, проколов плодный пузырь длинной иглой. Все манипуляции проводят стерильным инструментом, чтобы минимизировать возможные риски.
Нередко материалом становится спинномозговая или серозная жидкость. Это происходит при местной анестезии, которая вводится инъекционно.
Уточнить, какой тип материалов необходим для иммуноферментного анализа, должен специалист, направляющий на исследование. Часто берутся образцы сразу нескольких типов или из разных мест. Про подготовку к сдаче биоматериала пациенту тоже должен рассказать врач, выдающий направление на этот тип обследования.
Подготовка к иммуноферментному анализу
Для увеличения точности данных, полученных после иммуноферментного обследования, подготовка к отбору материала должна быть такой:
- за 10 суток до исследования исключить антибиотики, противовирусные и антимикотические препараты;
- за сутки необходимо исключить спиртное, курение и прием наркотических веществ;
- в этот же период необходимо избегать физического перенапряжения;
- предупредить специалиста, выписывающего назначение, о всех лекарствах, которые пациент принимает;
- оповестить врача в случае беременности или подозрении на беременность.
Лучше всего, если материалы для тестирования будут отобраны утром натощак.
Если диагностика ставит цель определить состояние гормонального фона, то важно обеспечить себе спокойное состояние накануне и избегать нервного напряжения. Для женщин сдача крови на гормоны четко определяется периодом месячного цикла, о чем будет сказано врачом в момент назначения.
За 2-3 дня до отбора материала нужно исключить из меню жареное и жирное, а перед анализом на гепатит не есть цитрусовые и любые другие фрукты и овощи оранжевого и желтого цвета.
Расшифровка результатов иммуноферментного анализа
Результат качественного исследования, как правило, обозначается знаками «+» (обнаружено) или «-» (не обнаружено).
По наличию или отсутствию определенных групп иммуноглобулинов можно делать такие выводы:
- JgM (-), JgG (-), JgA (-) — иммунитет к заболеванию полностью отсутствует (с таким типом антигена организм ранее не сталкивался);
- JgM (-), JgG (+), JgA (-) — ранее было столкновение с данным антигеном или с вакциной;
- JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) — острый патологический процесс (скорее всего первичный);
- JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) — процесс хронического течения;
- JgM (+), JgG (+), JgA (+) — рецидив;
- JgM (-) — стадия выздоровления.
Количественные значения несут большую информационную нагрузку, но трактовать их способен только лечащий врач, исходя из предыдущих показаний, возраста пациента, норм для каждого конкретного заболевания. Именно по этой причине оценивать результаты самостоятельно нельзя.
Сколько необходимо ждать результаты
Данная методика имеет много разновидностей, в зависимости от которых и определяется срок получения данных на руки. Средняя продолжительность ИФА-диагностики составляет 4-6 часов, что позволяет выдать результаты уже на следующий день.
Самые продолжительные методики занимают до 10 дней, например, в случае выявления ВИЧ-инфекции.
При острой необходимости возможно применение экспресс-методик, при которых ответ получают уже через 1-2 часа.
Где можно пройти ИФА тестирование
Поскольку оборудование для проведения такого типа диагностики довольно дорогое, то приобрести его могут не все лаборатории. Кроме того, тесты, содержащие специфические антигены, имеют ограниченный срок годности (обычно около 1 года), поэтому нуждаются в постоянном обновлении.
По этим причинам в государственных медицинских учреждениях ИФА-лаборатории есть далеко не всегда. Чаще всего необходимо обращаться в большие частные медицинские или крупные диагностические центры.
Для проведения ИФА-исследования лаборатория должна иметь специальную лицензию, а персонал и лаборанты должны пройти специальное обучение.
Чаще всего конкретный диагностический центр или лабораторию рекомендует врач, направляющий пациента на обследование.
Стоимость иммуноферментного исследования
Цена на данное исследование зависит от региона страны и от уровня клиники, предоставляющей услугу. В Москве минимальная цена за определение одного антигена стартует от 700 руб. Если необходимо выявить сразу несколько иммуноглобулинов, то цена будет суммироваться.
В случае срочного анализа стоимость увеличивается на 150-200 руб. за каждый антиген.
Несмотря на достаточно высокую стоимость, иммуноферментный анализ позволяет сделать обследование пациента максимально информативным и быстрым, что сокращает время до начала лечения и позволяет быстрее стабилизировать состояние человека.
На данном видео представлен фильм «Основы иммуноферментного анализа».
(Пока оценок нет)
Загрузка...